analiz arşivleri - Redo Analyzer

vegetables-573958_1920-1280x889.jpg

Gıdalarda veya gıda ile temas eden yüzeylerde mikroorganizmaların tespiti ve sayımı, herhangi bir kalite kontrol veya kalite güvence planının ayrılmaz bir parçasını oluşturur. Gıdalar üzerinde yapılan mikrobiyolojik testler iki türe ayrılabilir:

  • Numunedeki bir grup mikroorganizmanın sayıldığı ve sonucun numunenin birim ağırlığı başına mevcut organizma sayısı olarak ifade edildiği nicel veya sayısal

Veya;

(b) gereksinimin basitçe bilinen bir numune ağırlığında belirli bir organizmanın bulunup bulunmadığını tespit etmek olduğu niteliksel veya mevcudiyet/yokluk.

Gıdalardaki mikroorganizmaların test edilmesi için kullanılan yöntemlerin temeli çok iyi yapılandırılmıştır ve bir gıda örneğinin, içinde mikroorganizmaların çoğalabileceği ve böylece görsel bir büyüme göstergesi ile sonuçlanabileceği bir besin ortamına dahil edilmesine dayanır. Bu tür yöntemler basit, uyarlanabilir, kullanışlı ve genellikle ucuzdur. Bununla birlikte, bunların iki dezavantajı vardır: birincisi, testler ortamdaki organizmaların büyümesine dayanır. Bu da günler alabilir ve uzun bir test süresine neden olabilir; ve ikinci olarak, yöntemler elle yönlendirilir ve bu nedenle emek yoğundur.

Son yıllarda, hızlı ve otomatikleştirilmiş mikrobiyolojik yöntemler üzerine önemli araştırmalar yapılmıştır. Yeni yapılan analizlerin amacı ise bu testleri azaltmak olmuştur. Mikroorganizmaları tespit etmek ve/veya saymak için büyüme dışındaki yöntemleri kullanarak süreyi aşmak ve yöntemleri mümkün olduğunca otomatikleştirerek testlere manuel girdi düzeyini azaltmak temel hedeftir. Bu hızlı ve otomatik yöntemler, gıda endüstrisinde bir miktar kabul ve uygulama kazanmıştır. Mikrobiyoloji yöntemleri, Kalite Kontrol (QC) için temeldir, ancak gıda güvenliğine yönelik bir Kalite Güvencesi (QA) yaklaşımına doğru amansız bir hareketle, pek çok karalamanın asıl nedeni olmuştur. Bununla birlikte, mikrobiyolojik testler, tüm sınırlamaları ile bile, uygulama ve vurguda bir değişiklik olsa da, bu güvencenin bir parçası olarak artık temel bir araç olarak görülmektedir.

QC ve QA, güvenliği sağlamak için iki farklı yaklaşımdır; her iki sistem de araçları paylaşır, ancak vurgu çok farklıdır. Her iki yaklaşım da meşrudur ancak tamamen farklı organizasyonlara, yapılara, becerilere, kaynaklara ve çalışma biçimlerine ihtiyaç duyarlar. QC, dış dünyadaki baskılardan etkilenen reaktif bir yaklaşımdır. Bir QC organizasyonunda vurgu, sağlam ve istatistiksel olarak ilgili olması gereken ölçüm üzerindedir ve odak noktası yasal ve ticari konulardır. Buna karşılık, QA, şirketin dahili standartları tarafından yönlendirilen önleyici bir yaklaşımdır. Sağlam olması ve düzenli olarak gözden geçirilmesi gereken operasyonel prosedürlere vurgu yapılır ve odak noktası tüketicidir.


lipstick-791761_1920-1280x853.jpg

Dioksan, etilen oksidin dimerizasyonu nedeniyle etoksillenmiş alkollerin ve etoksillenmiş alkilaminlerin sentezi sırasında bir yan ürün olarak oluşturulabilir. Etoksillenmiş alkoller formülasyonlarda emülgatör olarak kullanılırlar ve etoksillenmiş sülfatların üretiminde ham madde olarak da kullanılabilirler. Etoksillenmiş alkilaminler, birkaç katyonik yüzey aktif maddenin sentez yolundadır. Dioxane hayvanlar üzerinde kanserojen etkilere sahiptir ve muhtemelen insanlar için de kanserojendir. Avrupa mevzuatına göre, 1,4-dioksan, kozmetik ürünlerin bileşiminin bir parçasını oluşturmamalıdır. Ayrıca, ABD Gıda ve İlaçları 1979’dan beri kozmetikte 1,4-dioksan varlığına ilişkin İdare (FDA) araştırmaları, hammaddelerin üretim sürecinde (muhtemelen vakumla sıyırma prosedürleri) yapılan değişikliklerden sonra 1,4-dioksan içeriğinde bir azalma bulmuştur.

Bir araştırma grubu tarafından, ön işleme tabi tutulmadan şampuanlarda uygulama için dahili standart olarak izobütanol kullanan GC-FID önerilmiştir. En düşük dioksan içeriği, etoksillenmiş içerik içermeyen bir şampuanda tespit edilmiş; etoksillenmiş bileşikler içerenler için 6–144 mg/ml dioksan aralıktaydı. Ayrıca, GC-FID kullanılarak, hammaddelerde (etoksile alkil sülfatlar) ve kozmetik ürünlerde dioksan kalıntısını belirlemiştir. İki ön arıtma yöntemi, azeotropik damıtma ve katı faz ekstraksiyonu (SPE) karşılaştırıldı. 1979 ve 1997 yılları arasında ham maddelerde (genellikle amonyum ve sodyum lauret sülfat) rapor edilen değerler 1410 mg/ml’ye kadar olan seviyelerdeydi. Bitmiş ürünlerde seviyeler 279 mg/ml’ye kadar çıkarken 1994-1995 yılları arasında çocuk şampuanlarında 85 mg/ml’nin üzerinde seviyeler kaydedilmiştir.

1988’de çözücü olarak dimetilformamid kullanılarak GC. Elde edilen tespit limiti 2 mg/g olup, şampuanlar ve vücut losyonları için uygulanmıştır. Çin pazarındaki şampuan ve banyo losyonundaki dioksan içeriğini headspace GC kullanılarak incelenmiştir. Yerli ürünlerde ithal ve ortak girişim ürünlerine göre daha yüksek içerik tespit edildi. Hammaddelerin (etoksillenmiş sülfatlar) rutin analizleri için ters fazlı LC yöntemi önerildi. Kromatografik koşullar, gradyan elüsyonu (su-asetonitril), UV saptaması ve SPE ile önceki bir saflaştırma adımı kullanılarak bir C18 kolonunda gerçekleştirilmiştir.

Dioxane şampuanlarda, sıvı sabunlarda, güneş kremlerinde, banyo köpüklerinde, nemlendirici losyonlarda, temizleme sütleri, tıraş sonrası balzamları, bebek losyonu, gündüz kremleri ve saç losyonu kapiler GC-MS ile analiz edildi. SPE kullanılarak bir ön saflaştırma aşaması gerekli olmasına rağmen, analiz süresi 3 mg/kg kantitatif limit ile 40 dakikadan azdı. Analiz edilen kozmetiklerin %56’sının Dioksan içeriği 3.4-108 mg/kg aralığındaydı. EI yöntemiyle başka bir GC-MS, dahili standart olarak döteryumlu dioksan kullanılarak dioksan belirledi. Ön işlem, bir özütleme prosedürünü (heksan ve metilen klorür kullanılarak) ve SPE’yi içermiştir. 0.1 mg/g kantitatif limit elde edilmiş ve losyonlar, şampuanlar, kremler, temizleyiciler ve saç kremleri 5 mg/g’ın altındaki seviyelerde tutulmuştur. CG ve GC-MS ile birleştirilmiş katı fazlı mikroekstraksiyon (SPME), üç tip noniyonik yüzey aktif maddede (polietilen oksit, poli(etilen/propilen) oksit, polihidrik alkol) kozmetik ürünlerinde kalan dioksanı analiz etmek için kullanıldı. SPE’ye kıyasla SPME ile daha kısa ön işlem süresi, daha iyi hassasiyet ve tespit limitleri elde edilir. Test edilen iyonik olmayan yüzey aktif maddeler için tespit limiti, 0,06 ila 0,51 ppm idi. ABD ve Avrupa’dan gelen iyonik olmayan yüzey aktif maddelerde 1,4-dioksan tespit edilmedi, ancak Tayvan’dan gelenlerde 12 ila 72 ppm değerleri ölçüldü. Şampuan ve sıvı sabun örneklerinin %22’sinde 4 ile 41 ppm arasında değişen değerler tespit edilmiştir.


meal-2834549_1920-1-1280x814.jpg

Son yıllarda, yeni patojenlerin ortaya çıkmasıyla gıda kaynaklı hastalıkların epidemiyolojisi değişmektedir. ‘Yükselen hastalıklar’, son yıllarda prevalansı artan veya yakın gelecekte artması muhtemel olanlar olarak tanımlanmaktadır. Bu nedenle ortaya çıkan bir patojenin yeni evrimleşmesi gerekli değildir. Ortaya çıkan olarak kabul edilen gıda kaynaklı hastalıklar arasında enterohemorajik Escherichia coli (EHEC veya vero sitotoksijenik, VTEC özellikle serovar O157:H7), Campylobacter jejuni, Salmonella Typhimurium Definitive Type (DT) 104’ün neden olduğu hastalıklar yer alır. Ancak nispeten yakın zamanda gıda araçlarıyla ilişkilendirilmiştir.

Bu gıda kaynaklı patojenlerin çoğu, insan olmayan bir hayvan rezervuarına sahiptir ve zoonoz olarak adlandırılır, ancak bunlar mutlaka hayvanda hastalığa neden olmazlar. Daha önce, zoonotik hastalıkların gıda yoluyla bulaşmasını önleme yöntemi olarak hayvan veya karkas muayenesi kullanılıyordu. Fncak artık buna güvenildiğini söylenemez. Hem E. coli O157:H7 hem de S. Typhimurium DT 104, sığırlarda bulunur ve nispeten yeni evrimleşmiş patojenlerin örnekleridir. E. coli O157:H7 muhtemelen enteropatojenik bir O55:H7 atadan evrimleşmiştir. Vero sitotoksijenik E. coli ile ilişkili hastalık salgınları ilk kez tanımlandığında, çoğu hamburger gibi az pişmiş sığır etiyle ilişkilendirildi. Daha yakın zamanlarda, EHEC ile ilişkili gıda araçlarının listesi uzamakta ve artan sayıda enfeksiyon, sebze ve meyve gibi taze ürünlerle ilişkilendirilmektedir. Enterohaemorrhagic E. coli O157:H7 ve diğer EHEC tipleri, ‘kural kitabını’ çeşitli şekillerde değiştirmiştir.

Elma suyu ve fermente etler gibi geleneksel olarak ‘güvenli’ kabul edilen bazı gıdalar hemorajik kolite ve EHEC ile ilişkili daha ciddi hastalıklara neden olmuştur. Gıdalarda organizmanın büyümesi enfeksiyona neden olmak için gerekli değildir, bu nedenle herhangi bir kontaminasyon, çok düşük seviyelerde bile ciddi sonuçlara yol açabilir. Endişe verici bir şekilde, ikinci bir EHEC grubunun (öncelikle O26:H11 ve O11:H8 serotiplerini içeren) yeni bir alt klonu Avrupa’da ortaya çıkmıştır ve bu klon, O157:H7’nin aynı belirgin virülans faktörlerini paylaşır ve sığır rezervuarında yaygındır. Bu organizmalar ve onlar gibi diğerleri, gelecekte gıda kaynaklı önemli patojenler olarak ortaya çıkabilir.

Genetik karışıklık, plazmitler, transpozonlar, konjugatif transpozonlar ve bakterofajlar dahil bir dizi genetik element tarafından kolaylaştırılır. Yatay gen transferi yoluyla evrimleşme ve ‘yabancı’ DNA elde etme yeteneği, yeni fenotiplerin ve genotiplerin ortaya çıkmasına neden olmuştur ve bu, organizmaları bir veya iki özelliğe göre gruplamayı tercih eden bazı mikrobiyologlar arasında kafa karışıklığına neden olmaktadır. Örneğin, genellikle neden olunan hastalık temelinde ve ayrıca esas olarak örtüşmeyen virülans faktörlerinin varlığı ile karakterize edilen, ishalli E. coli’nin altı patotipi vardır. Bununla birlikte, ishal hastalığı ile ilişkili E. coli izolatlarını tanımlayan çalışmaların sayısı giderek artmaktadır. Bazı durumlarda, virülans faktörleri, patojenite adaları olarak adlandırılan geniş DNA bölgelerinde kodlanır ve bunlar farklı patojenik organizmalar arasında paylaşılarak mikrobiyal evrime katkıda bulunur. Virülans genlerinin aktarımı için önemli vektörler olmanın yanı sıra bakteriyofajlar gibi bazı genetik elementler de Vibrio cholerae’de gösterildiği gibi bakteriyel virülansın ekspresyonu için önemli öncüler olarak hizmet eder. Enterobacteriaceae’nin bazı üyelerinin mutS geninde DNA onarım süreçlerini yöneten kusurlar taşıdığı da gösterilmiştir. Silmelerin oluşumu ayrıca sözde ‘genom plastisitesinde’ önemli bir rol oynar ve gelişmiş işlevselliğe sahip organizmaların gelişimine katkıda bulunabilir. Belirli bölgelere özgü DNA dizilerini belirleyen yeni teknikler, yeni patojenlerin gelişmesine izin veren evrimsel mekanizmaların araştırılmasına izin vermeli ve bu organizmaların tanımlanmasını ve karakterizasyonunu kolaylaştıracaktır. Bu tür teknikler yakın zamanda eski E. coli soylarının aynı virülans faktörlerini paralel olarak kazandığını göstermek için kullanılmıştır. Bu da doğal seleksiyonun düzenli bir gen edinimini ve virülansı artıran moleküler mekanizmaların progresif oluşumunu desteklediğini gösterir. Belirli ortamlara adaptasyon, S. Typhimurium DT 104‘ün yakın zamanda ortaya çıkmasında rol oynamış gibi görünmektedir. Bazı araştırmacılar, antibiyotik kullanımının insan sağlığı, tarım ve su ürünleri yetiştiriciliğinde Salmonella suşlarının seçilmesiyle sonuçlandığını öne sürmüştür. Bir organizmanın çevresi tarafından empoze edilen ‘streslerin’, daha da öldürücü olan suşları seçmeye hizmet edebilecek adaptif mutasyonları teşvik eden potansiyel bir itici güç olması koşuluyla, virülansı modüle edip artırabileceğine dair artan kanıtlar vardır. Demografi, tüketici eğilimleri ve gıda üretimindeki değişiklikler ile ilgili faktörler de ortaya konmuştur. Bu değişimlerin çoğu, tek bir enfeksiyon kaynağının potansiyel etkisini büyütmüştür.


salad-1672505_1920-1280x854.jpg

Gıda kaynaklı hastalıkların yıllık insidansının doğru tahminleri, farklı ülkelerdeki raporlama sistemlerine bağlı olarak zor ve bazen imkansızdır. Raporlama sistemlerinin diğer bazı bölgelerden daha iyi olduğu bazı Avrupa ülkelerinde ve Amerika’da gıda kaynaklı hastalık istatistiklerine salmonelloz ve kampilobakteriyoz vakaları hakimdir. Ancak diğer bölgelerde, gıda kaynaklı hastalık istatistikleri yalnızca salgın bilgilerine dayanma eğilimindedir ve bazı durumlarda diğer organizmalar hastalığın önde gelen nedenleri olarak tanımlanır.

Örneğin, Tayvan’da 1994 yılındaki salgınların %74’üne Vibrio parahaemolyticus (%56,7), Staphylococcus aureus (%20,3), Bacillus gibi bakteriyel patojenler neden olmuştur. Nitekim Cereus (%14,9) ve Salmonella (%8,1) tanımlanan başlıca etkenlerdir. Güneydoğu Çin’de 1986-87 yılları arasında ishal hastalığı üzerine yapılan bir çalışmada, ishal hastalığının genel insidansı 1000 nüfus başına 730 şeklindedir.

Oluşma sıklığına göre en sık izole edilen organizmalar enterotoksijenik Escherichia coli, Shigella türleri, enteropatojenik E. coli, Campylobacter jejuni, vibrios ve enteroinvazif E. coli göze çarpmaktadır. Bu organizmalar ve Entamoeba histolytica, gelişmekte olan ülkelerde tipik ishal nedenleridir. Gıdaların, bu hastalıklarda olası birkaç enfeksiyon kaynağından yalnızca biri olacağını hatırlamak önemlidir. Ancak bu bölgelerde iyi epidemiyolojik verilerin olmaması, gıdanın rolünün yeterince tanınmamasına yol açmaktadır.

ABD’de, gıda kaynaklı hastalıkların her yıl yaklaşık 76 milyon hastalığa, 325.000 hastaneye yatışa ve 5000 ölüme neden olduğu; bilinen patojenlerin 14 milyon hastalık, 60.000 hastaneye yatış ve 1800 ölüme neden olduğu tahmin edilmektedir. Çalışmalarda, salgınla ilgili vakalar ve pasif ve aktif sürveyans sistemleri dahil olmak üzere bir dizi kaynaktan alınan veriler kullanılarak tahminler yapılmıştır. En fazla sayıda etkene neden olduğu belirlenen organizmalar, gıda kaynaklı hastalık vakaları Norwalk-benzeri virüslerdir. Bunu sırasıyla campylobacters, salmonellas, Clostridium perfringens, Giardia lamblia, staphylococci, Escherichia coli ve Toxoplasma gondii izlemektedir. Farklı ülkelerdeki gıda kaynaklı hastalık insidansını karşılaştırmak, farklı raporlama sistemleri nedeniyle genellikle zordur.

Ayrıca yoğun insan nüfusu ve kesinleşmeyen tanılar sebebiyle verilen sayıların düşük olacağını tahmin etmek gerekir. Gıda kaynaklı hastalıkların tıpkı yetersiz beslenme gibi ciddi bir problem olduğunu ancak insanların bunu her zaman yeteri kadar ciddiye almadığı bir gerçektir. Gıda temelli hastalıkların önüne geçebilmek için üreticilerin doğru analiz ve sertifikasyon yöntemlerine gitmeleri hem şirketlerinin güvenilirliği hem de müşterilerinin sağlığı açısından son derece önemlidir.


salad-2756467_1920-1280x854.jpg

Gıda kaynaklı hastalıklar, tüm dünyada halk sağlığı için yaygın ve ciddi bir tehdit olmaya devam ediyor ve önemli bir morbidite nedenidir. Hem sanayileşmiş hem de gelişmekte olan ülkeler çok sayıda hastalıktan mustariptir ve küresel bazda insidans giderek artmaktadır.

Gıda kaynaklı hastalıkların çoğu hafiftir ve ishal ve kusma gibi akut gastrointestinal semptomlarla ilişkilidir. Bazen gıda kaynaklı hastalık çok daha ciddi ve özellikle gelişmekte olan ülkelerdeki çocuklarda yaşamı tehdit eder ve enfeksiyonu kronik sekel veya sakatlık da izleyebilir. Gıda kaynaklı hastalıklarla ilgili bilgilerin toplandığı birçok ülkede toplam vaka sayısı son 20-30 yılda artış göstermektedir. Örneğin, Birleşik Krallık’ta, 1977’de kaydedilen vaka sayısı 10000’in biraz altındayken, 1998’de 90,000’den fazla vakaya yükselmiştir. Çoğu Avrupa ülkesi, 1985 ve 1992 yılları arasında salmonelloz vakalarının iki katına çıktığını bildirmiştir. Örneğin Birleşik Krallık’ta, 1994’te 33600 (100.000’de 58) ile karşılaştırıldığında 1981’de 12 846 enfeksiyon (100.000’de 23) vardı.

Kuzey Amerika’da 1980’lerin sonundan beri Salmonella Enteritidis’in neden olduğu enfeksiyonlarda kayda değer bir artış olmuştur. Kaydedilen artışların bir kısmı, şüphesiz, bilgi toplama ve raporlama için geliştirilmiş sistemleri sayesinde tesptit edilebilmiştir. Tanılar ve gıda güvenliği konusunda daha fazla farkındalık, ancak bu değişiklikler gözlemlenen genel artışları açıklamamaktadır. Son yıllarda gıda güvenliği konusundaki artan farkındalık, düzenleyici ve eğitici önlemlerdeki değişiklikler ve gıda üretimindeki uygulamadaki değişiklikler, bazı bölgelerde belirli gıda kaynaklı hastalıkların görülme sıklığının azalmasına yol açmıştır.

Örneğin, 2000 yılında, Birleşik Krallık’ta Salmonelloz 1985’ten bu yana en düşük seviyesindeydi ve rapor edilen vaka sayısında bir önceki yıla göre %54’lük bir düşüş yaşandı. Son zamanlarda ABD’de de salmonelloz vakalarının sayısında bir azalma gözlemlenmiştir. Salmonelloz’daki bu özel düşüşler aşılama programlarına bağlanmıştır. Son yıllarda Birleşik Krallık ve ABD’de de listeriyoz vakalarının sayısında azalmalar gözlemlenmiştir. Ancak, kampilobakterler gibi diğer patojenler için ilişkili vakaların sayısı birçok ülkede sabit bir oranda artmaya devam etmektedir.

Gelişmiş ülkelerde dahi ortaya çıkan gıda kaynaklı zehirlenmeler, dünyadaki tüm insanlığın riskli bir konumda olduğunun göstergesidir. Kodekslerle ve hukuki denetim mekanizmalarıyla kontrol altında olduğu düşünülen refah ülkelerinin dahi içinde bulunduğu bu tehlikeli durum, insan sağlığının endüstriyel bir tehdit altında olduğunu göstermektedir. Üstelik bunlar yalnızca tespit edilebilmiş araştırmalar ışığında ortaya çıkmış birtakım olaylardır. Tespit edilememiş ya da henüz teknolojik olarak vaka tespitine yetkinlik kazanamamış olayların yaşanması da olasıdır.


sunlight-3130638_1920-1280x853.jpg

Gelişmiş ülkelerin kozmetik kodekslerine göre, UV ışığını emen kozmetik bileşenler ve içerik karışımları, özellikle kullanılan UV filtre kimyasalları, örneğin kozmetiklerin ışık stabilitesini sağlamak için veya kullanılan güneşten korunma ürünlerinde akut fototoksisite ve fotogenotoksisite potansiyeli açısından test edilmesi gerekir. Fotosensitizasyon potansiyelinin (immünolojik fotoalerji) test edilmesi özel olarak gerekli değildir, ancak yine de sıklıkla gerçekleştirilir. Akut fototoksisite, cildin belirli kimyasallara ilk maruz kalmasından ve ardından ışığa maruz kalmasından sonra ortaya çıkan veya bir kimyasalın sistemik uygulamasından sonra cilt ışınlaması ile benzer şekilde indüklenen toksik bir tepki olarak tanımlanır. Bu alanda üç olası yönteme başvurulur.

3T3 NRU PT testi, akut fototoksik potansiyeli belirlemek için temel bir yüzeyle birlikte kullanılır. UVA/Vis ışığının sitotoksik olmayan bir dozuna maruz kalmanın varlığında ve yokluğunda test edildiğinde bir kimyasalın sitotoksisitesinin karşılaştırmasına dayanır. Bu testteki sitotoksisite, test kimyasalı ve ışınlama ile muameleden 24 saat sonra vital boya (NR) alımının konsantrasyona bağlı azalması olarak ifade edilir. Kalıcı bir fare fibroblast hücre hattı, Balb/c 3T3, 24 saat boyunca kültürde tutulur. Test kimyasal başına iki 96-yuvalı plakalar daha sonra ön-inkübe edilir, 1 saat boyunca kimyasal sekiz farklı konsantrasyonlarına sahiptir. Daha sonra iki plaka arasında bir, 5 J / cm² UVA (UV deneyi) bir sitotoksik olmayan UVA / VIS ışık dozuna maruz diğer levha koyu (UV deneyi) tutulur. Her iki plakada da tedavi ortamı kültür ortamı ile değiştirilir ve 24 saat daha inkübasyondan sonra; hücre yoluyla yeteneği 3 saat boyunca NRU tarafından belirlenir. NR hücre zarlarına nüfuz eder ve hücre içinde lizozomlarda birikir. Hücre yüzeyi ya da hassas lizozomal değişiklikler, bir zar kurşun NR alımı azalmıştır. Foto-tahriş edici arasında ayrım yapmak için ve foto-tahriş edici olmayan kimyasallar, foto-tahriş faktörü (PIF) oranı olarak tanımlanmıştır. Detaylı analizlerin sonucunda, ciddi sonuçlar elde edilir ve hemen her şeyin sonucuna varıldığı düşünülebilir. Çünkü bu testler gerçekten oldukça kapsayı ve gelişmiştir.

Sonuç olarak, in vitro testlerin akut fototoksik tehlikelerin tanımlanmasını yeterince kapsadığı kabul edilmektedir, bu nedenle şu anda bu son nokta için bu amaçla yapılan hayvan testleri %100 değiştirilebilir. Fotokimyasal genotoksisite alanında, in vitro genetik toksisite testlerinin neredeyse tamamı fotogenotoksisite testlerinin test protokollerine dönüştürülmüştür ve birkaç in vitro test kullanılabilir.

Prokaryotik, bakteriyel mutasyon testleri, ökaryotik memeli hücreleriyle yapılan herhangi bir fotogenotoksisite testinden daha kolay ve daha ucuzdur. Bu nedenle, ışığın paralel kullanımından uyarlanan ve daha sonra kozmetiklerin güvenlik testi için önerilen (P-AMES testi) ilk in vitro fotogenotoksisite testidir. Bununla birlikte, P-AMES testi hiçbir zaman resmi olarak onaylanmamıştır. Tüm P-AMES test protokollerinin kritik noktası, kullanılan Salmonella typhimurium veya Escherichia coli suşlarının UV duyarlılığıdır. Fotogenotoksinleri aktive etmek için gerekli ışık dozlarını elde etmek için kimyasalların genellikle bakteri yokluğunda önceden ışınlanması gerekir.


stomach-3532098_1920-1280x541.jpg

Perklorat toksisitesi hakkında mevcut tıbbi bilgilerin çoğu, perklorat toksisitesinin hipertiroidizm tedavisinde bir antitiroid etken olarak kullanılmasından kaynaklanmaktadır. Perklorat, tiroid iyodür alımını azaltarak tiroid hormonlarının üretimini azalttığı için bu amaçla kullanılmıştır. Ancak potansiyel toksisitesi ve yan etkileri nedeniyle bu amaçla perklorat kullanımı yerini diğer ilaç tedavilerine bırakmıştır.

Perklorat vücuttan hızla atılmasına rağmen, iyonik yarıçapı ve yükü iyodidinkine benzer olduğu için çevresel kaygılar mevcuttur. Sonuç olarak, perklorattiroid iyodür alımını tartışmasız bir şekilde bloke eder. İyot, tüm hücrelerde metabolizmayı düzenleyen tiroid hormonlarının üretimi için gereklidir. Bu nedenle perklorat, tiroidin normal işlevlerine müdahale edebilir ve temel hormonların konsantrasyonlarını değiştirebilir. Bazıları kanserojenlik dahil olmak üzere başka sağlık etkilerini göstermiş olsa da, perklorata maruz kalmak değişen derecelerde bilişsel bozulmaya neden olması en baskın tehdittir.

Tiroid hormonları fetüslerde, bebeklerde ve küçük çocuklarda büyüme ve gelişmenin kritik belirleyicileridir. Bu gruplar, tiroid eksikliği sorunları için hassas popülasyonlar olarak kabul edilir. Tiroid fonksiyonundan ödün vermiş ergenler ve yetişkinler veiyot eksikliği olanlar da potansiyel olarak hassas popülasyonlardır. Ek olarak, perklorat diğer hayvan türlerinin normal gelişimini etkiler, bu nedenle ekotoksisitesi üzerine önemli araştırmalar yapılmıştır. Birçok hayvan, kısmen insanların tiroid içinde nispeten yüksek hormon depolarına sahip olması nedeniyle perklorata insanlardan daha duyarlı görünmektedir ve insanlar ayrıca kandaki hormonları daha hızlı işlediğinden, böylece daha yavaş kaybolurlar. Çeşitli nedenlerle perklorat için koruyucu kriterler geliştirmek zor olmuştur.

Perkloratın etkileri, özellikle nispeten düşük dozlarda, hafif, karmaşık ve anlaşılması güçtür. Perklorat sistemden nispeten hızlı bir şekilde atılır ve etkileri sadece doz ve maruz kalma süresine değil, aynı zamanda organizmanın iyodür durumuna da bağlıdır. İnsanlar üzerinde sağlam epidemiyolojik çalışmalara izin verecek veritabanları mevcut değildir ve potansiyel ekolojik reseptörler üzerindeki perkloratın etkileri hakkında çok az bilgi bulunmaktadır. Ayrıca, mevcut altta yatan toksikolojik çalışmalarla ilgili önemli belirsizlikler ve tartışmalar olmuştur. Mevcut verilerin kalitesi ve geçerliliği ve yayınlanan sonuçların yorumlanması defalarca sorgulandı. Olumsuz bir etkinin ne olduğunu tanımlamak için bile güçlük çekildi. Son olarak, riske dayalı kriterler geliştirilirken verilere uygulanması gereken belirsizlik faktörleri hararetle tartışılmıştır. NRC raporu birçok sorunu çözmüş olsa da, tartışma tamamen bitmemiştir ve şaşırtıcı sonuçlar halen gözlemlenmektedir.


drop-of-water-578897_1920-1280x853.jpg

Perklorat kontaminasyonu birçok yönden tartışmalı bir konudur. 1990’ların sonlarında çok hızlı bir şekilde, bir kirletici olarak gündeme geldi ve son yıllarda sıcak bir konu olarak kalmaya devam etti. Aynı zamanda muazzam miktarda tartışmayı ve kamu ilgisini de üzerine çekmeyi başardı. Elbette, birincil kullanım alanı olarak katı roket iticilerinin bir bileşeni olarak görülmüş, halk için anlaşılır bir şekilde “içme suyundaki roket yakıtı” konusunda endişeye sebebiyet vermiştir.

Perklorata olan ilginin patlamasının nedenleri arasında hem analitik kimyadaki hem de perkloratın sağlık üzerindeki etkilerini anlamamızdaki son gelişmeler yer almaktadır. Kimyadaki teknolojik ilerlemeler, milyarda bir kısım (litre başına mikrogram [µg/L]) konsantrasyonlarında tespite izin vermiştir ve toksikolojik araştırmalar, bu tür konsantrasyonların özellikle gelişmekte olan fetüsler ve bebekler için endişe verici olabileceğini ileri sürmüştür. Bununla birlikte, perkloratın insan sağlığı ve diğer organizmalar üzerindeki etkileri konusunda büyük bir belirsizlik ve tartışma olmuştur. Ek olarak, büyük metropol alanlarda yüzey sularında ve içme suyu kaynaklarında perklorat kontaminasyonuna ilişkin birkaç yüksek profilli vaka olmuştur. Sorumlu taraflar, özellikle ABD Savunma Bakanlığı, yanıt vermek zorunda kaldı. Daha fazla maruz kalmayı önlemek ve kontamine alanları temizlemek için düzenleyici ve kamu baskısına hızlı bir şekilde yanıt verilmek istendi.

Perkloratın kimyasal özellikleri, onu içermesi ve işlenmesi son derece zor bir kirletici yapar. Özellikle yer altı sularında oldukça hareketlidir ve aerobik koşullarda biyolojik bozunmaya karşı dirençlidir. Sonuç olarak, birçok kirletici bulut geniş alanlara yayılarak potansiyel olarak çok sayıda insanı etkiler. Yeraltı suyundaki perklorat, özellikle 1990’ların sonlarında başlangıçta mevcut olan teknolojilerle, arıtılması da çok pahalıdır. Yeraltı suyu kontaminasyonu vakaları ve muazzam potansiyel hakkında kamuoyu endişeleri, Savunma Bakanlığı’nın mali sorumluluğu, Savunma Bakanlığı’nın Stratejik Çevresel Araştırma ve Geliştirme Programı (SERDP) ve ilgili Çevresel Güvenlik Teknolojisi Sertifikasyon Programı (ESTCP) tarafından perklorat üzerinde hızlı ve odaklanmış bir araştırma çabasına yol açmıştır. Bu araştırma üç alana odaklanmıştır: (1) içme suyu, toprak ve yeraltı suyu için uygun maliyetli iyileştirme teknolojilerinin geliştirilmesi ve test edilmesi; (2) perkloratla kirlenmiş bölgeleri karakterize etmek için geliştirilmiş yöntemler ve (3) perklorat maruziyeti nedeniyle insan ve ekolojik sağlık etkilerinin daha iyi anlaşılması.

Arıtma teknolojileri üzerine yapılan araştırmalar, daha uygun maliyetli ex situ arıtma, yer üstü arıtma üzerinde durmuştur. Yeraltı suyunda perkloratın arıtılması için yerinde biyoremediasyonun potansiyel değeri erken fark edildi ve araştırmalar, perklorata daha fazla maruz kalmanın azaltılmasına yardımcı olabileceğini ve ayrıca bu sorunla uğraşırken Savunma Bakanlığı’nın önemli kaynaklarından tasarruf edebileceğini kanıtladı. Yerinde biyoremediasyonun uygulanmasına yönelik çeşitli yaklaşımlar, tam ölçekli temizlikler için başarıyla gösterilmiş ve kabul edilmiştir. Diğer yaklaşımlar hala geliştirme aşamasındadır. Ancak çok umut verici görünmektedir.


paprika-2213271_1920-1280x853.jpg

Meyve, sebze ve yeşilliklerin canlı renkleri, onları albenili kılan en önemli göstergeleridir. Böylece ürünlerin taze ve diri olduğunu anlar; içeriğindeki faydalı maddeleri alacağımızdan emin oluruz. Ancak gelişmeye devam eden GDO’lu gıda piyasası, ürünlerin depolama sürelerini arttırmak ve oluşacak çürüme kaynaklı maddi zararı azaltmak için meyvelerin doğasıyla oynamaya devam etmektedir.

Polifenol oksidaz, sebze ve meyvelerde kahverengi bir renk üretmek için fenolik bileşiklerin oksidasyonunu katalize eden enzimler grubu için genel bir terimdir. Bu bakır enzimi, odifenollerin o-kinonlara oksidasyonunu katalize eder ve o-kinonlar, diğer o-kinonlarla ve proteinler, indirgeyici şekerler vb. gibi gıdaların birçok bileşeni ile kendiliğinden yoğunlaşarak, verimi çökelten yüksek moleküler ağırlıklı polimerler oluşturur.

Katekol + oksijen —— PPO ——> benzokinon + su —-> melaninler

Renk kaybına uğramış ürünler, tüketiciler tarafından daha az kabul edildiğinden, PPO’nun neden olduğu istenmeyen enzimatik esmerleşme büyük endişe kaynağıdır. Enzimler genellikle PPO, katekol oksidaz, fenolaz, tirozinaz ve kresolaz olarak adlandırılır. Meyve ve sebzelerde ve ürünlerinde bulunan enzim hakkında yakın zamanda yapılan bir araştırma, daha önce rapor edilenlerin uzun bir listesine birkaç yeni tür eklemektedir. Son literatür, yaprak döken meyveler, üzüm, patates, avokado, zeytin, muz, mango ve mantarlarda PPO ile ilgili daha fazla çalışma ile doludur. Enzimler yumru köklerde, depolama köklerinde ve meyvelerde bol miktarda bulunur. Yüksek enzim seviyeleri genellikle fenolik bileşiklerde de bulunan dokularda bulunur. PPO seviyeleri ve substratlar, özellikle meyve ve sebzelerde bitkinin yaşam döngüsü boyunca sıklıkla belirgin şekilde değişir. Taze meyve ve sebzelerin ekstraktlarında her zaman birden fazla PPO formu bulunur.

Olgun elmada, polifenol konsantrasyonu, PPO aktivitesi veya her ikisi de enzimatik esmerleşme derecesini belirler. Bir analiz, çeşitli elma çeşitlerinin aynı PPO’ya sahip olduğunu göstermiştir. PPO esas olarak nitroselüloz doku baskı yöntemi ile gösterilen meyvenin çekirdeği etrafında yer alır. PPO’nun bu lokalizasyonu, çekirdek çevresinde yoğun esmerleşmeye karşılık gelir. Olgunlaşmamış elmanın güçlü ve düzgün bir şekilde kahverengiye döndüğünü, olgun olanın ise zayıf ve sadece çekirdeğin etrafında kahverengileştiğini bulunmuştur. Olgun olmayan elmadaki hem polifenol içeriği hem de PPO aktivitesi olgun elmadakinden çok daha yüksekti ve aktif PPO esas olarak olgun elmada çekirdeğin yakınında lokalize olurken, olgunlaşmamış elmada eşit olarak dağıldı. Armut meyvesi, çekirdekte her zaman ete göre daha yüksek esmerleşme oranına sahiptir. Ayrıca, çekirdekten önce etli esmerleşme de gözlemlenmemiştir. Esmerleşme, esmerleşmenin çekirdekte başladığını ve daha sonra dışa doğru işlediğini gösterir. Bu nedenle semptomlar, önceki toplama tarihine / hasat tarihine bağlı çekirdek ve etli alanların daha yüksek esmerleşme zamanından önce fark edilmelidir.

Depolama sırasındaki esmerleşmede, iki depolama atmosferi (kontrollü atmosfer ve ultra düşük oksijen atmosferi) arasında hiçbir fark bulunmadı. ULO’da depolanan meyveler, iç bozukluklarda daha yüksek insidans gösterdi. PPO aktivite, BH-hasarlı meyvelerde açıkça inhibe edilmiş, ancak hasarlı meyvelerde geçici olarak artmıştır. Bu sonuçlar, enzimatik esmerleşme ve PPO’nun BH ve CB bozuklukları ile doğrudan ilişkili olmadığını ve bunların oluşumunda doğrudan yer almadığını göstermiştir. Patateste PPO, enzimatik esmerleşmenin başlıca nedenidir. PPO, enzimin yumru hücrelerinin amiloplastları içinde lokalize olduğu patates yumrularında özellikle belirgindir. Yumru başına PPO aktivitesinin yumru gelişimi boyunca artmaya devam ettiği, ancak taze ağırlık bazında en yüksek gelişmekte olan yumrularda olduğunu bildirilmiştir. PPO aktivitesi yumruda en fazla cilt ve cildin 1-2 mm altındaki korteks dokusu dahil dış tabakada bulunmaktadır. Patateslerde PPO aktivitesini ve bunun sonucunda ortaya çıkan enzimatik esmerleşme reaksiyonlarını azaltmaya yönelik olası bir yaklaşım, PPO’yu kodlayan genleri karakterize etmek ve etkisiz hale getirmektir. Bu tür inaktivasyon, hedef enzimler için spesifik antisens RNA üretilerek elde edildi. Daha düşük sıcaklıkta daha az PPO aktivitesi gözlendi. Daha büyük bir aktivite, daha büyük bir monomerik polifenollerin dönüşümü polimer olanlar için geçerlidir. Daha yüksek depolama sıcaklığındaki daha yüksek PPO aktivitesi, o sıcaklıkta polifenollerin polimerik pigmentlere dönüşmesi nedeniyle daha fazla renk bozulmasına neden olabilir.

Esmerleşme, baş marul ve minimal işlenmiş marulun hasat sonrası depolanması sırasında kalite kaybının ana nedenlerinden biridir. Marulun esmerleşmesinin biyokimyasal temelini anlamak ve bu renk bozulmalarını önlemek için fiziksel veya kimyasal işlemler bulmak için kapsamlı araştırmalar yapılmıştır. Yaralanma genellikle birçok bitki dokusunda fenilalanin amonyak-liyaz aktivitesinin artmasına ve fenolik metabolizmanın artmasına neden olur. Ek olarak, yaralanma, fenolik substratların ve PPO’nun karıştırılmasına izin veren ve esmerleşmenin gelişmesine yol açan hücresel departmanlaşmaya yol açar. Marul sapının renk değişikliği yaralanmanın neden olduğu bir esmerleşme türüdür. Marul hasadı, kahverengi pigmentlerin oluşumuna ve uç renginin solmasına yol açan yukarıda belirtilen tüm değişiklikleri indükleyerek gövde ucunun yaralanmasını gerektirir. Benzer değişiklikler, minimal olarak işlenmiş kesilmiş marulun depolanması sırasında marul orta damarlarında da meydana gelir.


tomatoes-321671_1920-1280x814.jpg

İnsan vücudu sürekli olarak sağlığa zararlı birçok maddeye ve bu nedenle tanımlanmış toksinlere maruz kalmaktadır. Toksinler, eksojen veya endojen kaynaklı olabilir. Endojen toksinler esas olarak normal metabolik süreçler (hücresel solunum, gıda sindirimi, atılım) sırasında oluşan ve metabolizmanın kendisinin atık ürünleri olan serbest oksijen radikalleri ile temsil edilir. Uzun süreli stres, çok yoğun fiziksel aktivite, büyük ve yüksek kalorili yemekler gibi belirli durumlarda endojen toksinlerin seviyesi artabilir. Öte yandan, ekzojen toksinler vücuda yutma, solunum, inhalasyon veya cilt absorpsiyonu yoluyla girer.

Birçok gıdada bulunan kimyasal bileşik katkı maddeleri, ilaç atık ürünleri ve ağır metaller olabilirler. Bu toksinler vücutta sinsice birikerek çeşitli düzeylerde hasara neden olabilir. Eksojen toksinlerin çoğu kontamine su, içecek ve yiyeceklerden kaynaklanır. Gıda toksinlerinin büyük bir sınıfı, protein ve peptit doğasını içerenlerdir. Toksik proteinlerin iyi bilinen örnekleri bolesatin ve risindir. Bolesatin, ciddi gastroenterite neden olan Boletus satanas mantarından izole edilen bir glikoproteindir. Bu lektin, çok düşük konsantrasyonlarda insan lenfositleri üzerinde mitojenik aktiviteye sahipken, daha yüksek konsantrasyonlarda protein sentezini inhibe eder. Ricinus communis bitkisinin tohumlarında bulunan bir protein olan Ricin, güçlü bir doğal sitotoksindir: ribozomlardaki protein sentezi aktivitesini bloke ederek hücre ölümüne neden olabilir.

Toksisiteleri nedeniyle, protein toksinlerinin tespiti için doğru ve hassas yöntemlere ihtiyaç vardır. Ancak bu moleküllerin büyük karmaşıklığı (yüksek moleküler ağırlık, alt birimlerin varlığı, glikosilasyon, mikro-heterojenlik) bu görevi çok zorlaştırmıştır. Bununla birlikte, son yıllarda, çoğunlukla kütleye dayalı yeni analitik ‘omik’ platformların gıda analizindeki uygulaması, spektrometri teknolojileri, kalitatif ve kantitatif proteom veya peptidom analizini mümkün kılmıştır. Bazı bilim insanları, üretim iyonunda çalışan lineer iyon tuzağı ile izotop seyreltme kütle spektrometrisi kullanarak musluk suyu, süt, elma suyu ve portakal suyu gibi içeceklerdeki risini tespit etmek ve ölçmek için hassas ve seçici MS tabanlı bir yöntem geliştirdiler.

Son yıllarda yapılan kapsamlı araştırmalar, birleşik omik teknolojiler tarafından üretilen verilerin gıda teknolojisi için benzersiz bir kaynak oluşturduğunu göstermiştir. Bu bölümün odak noktası, gıdaların peptit ve protein toksinleri ve bunların gıdaları temizleme yöntemlerindeki en son gelişmelerdir. Özellikle, ‘omik’ tekniklerinin, çeşitli gıda kategorilerinde eşzamanlı nitel ve nicel toksin ölçümüne izin vererek, gıda kalitesinin izlenmesi için potansiyel olarak kapsamlı bir yöntem sınıfı oluşturduğunu göreceğiz. Omik yaklaşım, biyolojik sistemler hakkında küresel bir bilgi perspektifi sağlayabilir ve bu aynı zamanda gıdaları, zaman içindeki evrimini ve insan sağlığı üzerindeki etkilerini de içerir. Proteomik ve metabolomik (türetilmiş dalları ile birlikte) halihazırda olgunlaşmıştır (ancak hala gelişmektedir) ve karmaşık gıda matrislerinin bileşimi ve kontaminasyonu ile mücadele edebilen teknolojilerdir. Bu yaklaşımlar sayesinde gıda örneklerindeki düşük miktarlardaki toksinler bile gıda örneklerinde de hızla tespit edilebilmektedir.


İletişim

Göztepe Mah. İstoç İkinci Cad. No: 1 Kat : 4 İç Kapı no : 42 BURAK PLAZA Bağcılar / İSTANBUL
+90 (544) 930 70 90

+90 (212) 599 18 19

+90 (212) 599 18 13

info@analyzer.com.tr

Bizi Takip Edin

Bizi sosyal medya platformlarından da takip edebilirsiniz.